回顾丨第四届中国母胎医学大会圆满结束

01

基因组时代下的PGT技术

—— 黄锦 北京大学第三医院

PGS：非整倍体筛查（PreimplantationGenetic Screening）

适用人群：高龄，反复着床失败，复发性流产

目的：提高IVF妊娠率（low riskPGD）

PGD：植入前基因诊断（PreimplantationGenetic Diagnosis）

是在胚胎着床之前即对配子或胚胎进行遗传物质分析，选择没有遗传物质异常的胚胎移植。

目的：染色体异常和遗传病（highrisk PGD）

为便于理解和区别，国际上PGD和PGS逐渐被弃用，而统一用PGT。

PGT：移植前基因检测（PreimplantationGenetic Testing）

PGT家族中，包括PGT-A、PGT-M、PGT-SR

PGT-A：针对胚胎染色体非整倍体检测的胚胎植入前遗传学检测技术，其中的A是指“Aneuploidy（非整倍体）”

PGT-M：针对单基因病（胚胎是否携带可导致单基因病的突变基因）检测的胚胎植入前遗传学检测技术。其中M是指“Mongenic disorders（单基因遗传病）”

PGT-SR：针对染色体结构异常检测的胚胎植入前遗传学检测技术。其中SR是指“Structural Rearrangement（结构的重组）”

PGS对应PGT-A，PGD对应PGT-M和PGT-SR

02

NIPT PLUS进展-来自临床医生的思考

—— 李洁 南京大学附属鼓楼医院

胎儿染色体异常筛查的进程

从NIPT到NIPT plus：染色体异常与异常表型

NIPT的现状：近20%的临床表型相关的染色体异常被忽略了

常见三体异常见核型异常案例的75%，常见三体加性染色体异常仅占85%；17%的临床表型相关的染色体异常未检测到。

03

产前分子遗传学诊断的应用和进展

—— 边旭明 北京协和医院

我国的人口现状和出生缺陷数量

1）每年出生缺陷发生在85-100万；

2）约为加拿大每年总出生人口的2-3倍；

3）临床可见的缺陷在25-29万/年；

4）总体出生呈现量到质的转变。

国内产前筛查工作的特点

1）2007年后中国的产前筛查工作快速进展；

2）筛查目标疾病以常见胎儿非整倍体异常为主；

3）受政策影响，筛查目标人群主要是低龄产妇；

4）筛查最主要模式是中孕期三联血清学筛查；

5）NIPT技术2014年后融入到临床应用体系。

目前主要的努力方向

1）明确筛查机构管理体系；

2）建立技术质控体系；

3）纳入政府医疗支付体系。

NIPT尚未成为一线筛查技术

1）价格依然无法适应临床需要；

2）医疗机构自主提供服务的能力不足；

3）实验室外送模式受到政策的制约；

4）医务人员专业认知程度较低；

5）缺乏有效的实验室质量评审；

6）受商业领域的恶性时间的影响。

我国产前诊断的特点

1）目前完成的产前诊断量仅为需求量的7-8%（以2015年为例），上升空间很大；

2）羊膜腔穿刺占90%，提示：（1）产前诊断的主要目标是高龄和产前筛查高风险；

（2）产前筛查以中孕期为主。

3）针对超声异常的产前诊断数量有较快的增长；

4）需加强对单基因病、超声异常、染色体结构异常的产前诊断能力；

5）国内产前诊断中心的规模普遍较小；

6）产前诊断主要技术为细胞遗传学核型分析，分子遗传学诊断初漏端倪（芯片和CNV-Seq为主）。

产前诊断服务的供需差距依然巨大

以2015年为例进行概算：

年出生人口      1655万

高龄孕妇比例    10.3%（170万）

血清学筛查高风险 5%（74.3万）

需行产前诊断人数280万，当前仅完成23万例，仅为需求人数的8.2%。

产前筛查和诊断的支付问题

1）目前国内的产前筛查和诊断费用基本自付；

2）社会医疗保险可能承担20-30%；

3）在低收入地区如何推广应用遗传诊断技术是我们面临的重要挑战之一；

4）产前筛查和诊断的费用均未纳入保险，进一步突出了解决费用支付问题的迫切性。

国内产前筛查和诊断的新方向

胎盘源性疾病的产前筛查

1）孕前和孕期的携带者筛查；

2）胎儿染色体微缺失和微重复的筛查；

3）胎儿单基因病的产前筛查；

4）胎儿超声异常的遗传学诊断；

5）单基因病的先证者和产前诊断。

04

基于母外周血中cfDNA的单基因病产前诊断

—— 朱宝生 云南省第一人民医院遗传诊断中心主任

单基因病现状严峻

单基因病现有8000多种，综合发病率1/100，多数致死、致畸、致残，仅有5%单病有有效的药物。

预防单基因病的首发比再发更为重要

单基因疾病患儿的父母大都正常，为什么他们会有这么严重的病？

常染色体隐性遗传，后代1/4患病；X染色体遗传，母亲携带，男性后代1/2患病。

2015年ACMG、ACOG、PQF、NSGC、SMFM生殖医学中的扩展性携带者筛查联合声明

建议：

1）对于育龄女性，携带者筛查最好在妊娠前进行；

2）在使用供者配子前，携带者需作为筛查项目之一；

3）疾病标准：致愚、需要手术或者医学干预、影响生命质量的疾病；通过产前诊断或分娩管理等可以改善临终结局；成年发病、外显率低、突变频高疾病可不筛查。

05

低深度全基因组测序技术在产前诊断红应用的专家共识解读

—— 邬玲仟 中南大学医学遗传学国家重点实验室

背景

1）CNVs所致的染色体微缺失/微重复综合征已达300多种；

2）核型分析与芯片分析均存在一定缺陷。

核型分析：检测周期长、分辨率低、无法检测5Mb以下CNVs；

芯片：通量低、成本高、探针覆盖范围有限。

CNV-seq适用范围

1）染色体病高风险胎儿，如产前筛查高风险、高龄、产前超声异常，CNV-seq可作为一线产前诊断方法；

2）染色体核型分析不能确定染色体畸变的来源和构成时，建议采用CNV-seq；

3）胎儿新发染色体结构重排，由于不能排除重排过程是否导致染色体微缺失/微重复，建议采用CNV-seq；

4）夫妇一方为染色体结构重排携带者，产前诊断时建议同时进行核型分析和CNV-seq；

5）中晚孕期需要进行产前诊断排除染色体异常，无法进行羊水细胞培养，可抽取羊水行CNV-seq检测；

6）CNV-seq可用于对流产物、死胎或引产胎儿组织的检测，以提高病因检出率。

CNV-seq局限性

无法检测三倍体及多倍体、单基因病、杂合性缺失等。

06

9821例NIPT PLUS 检测和咨询探讨

—— 唐少华 温州市产前诊断中心

临床咨询需要注意的问题

1）NIPT-plus检测对于性染色体异常类型中XO假阳性最多；

2）但XO高风险人群羊水穿刺率最低；

3）性染色体异常胎儿一般产前不干预处理；

4）但对于XO咨询时需要注意XO/XY可能漏检的风险；

5）建议羊水穿刺（原位培养）或出生后检查。

9821例无创DNA-plus结果

1）发现胎源CNV变异24例；

2）其中3例22q11.21，为致病性变异，新发突变，未发现母源22q11.21缺失；

3）发现母源CNV变异81例；

4）羊水穿刺16例，9例基因芯片结果一致；

5）片段长度基本一致；

6）一致率56%。

07

专题发言：产前TORCH检测的临床咨询

—— 吕时铭 浙江省产前诊断中心主任

出生缺陷的防控

1）年龄；

2）遗传的：染色体，基因异常；

3）孕期疾病：甲状腺功能紊乱，糖尿病；

4）孕期感染：TORCH；

5）化学（药物），物理（射线）。

TORCH的含义

宫内感染

Toxoplasma（弓形虫）

Other infections（细小病毒B19，沙眼衣原体，柯萨奇病毒，梅毒螺旋体，水痘等）

Rubella virus（风疹病毒）

Cytomegalovirus（巨细胞病毒）

产时感染

Herpes Simplex virus（单纯孢疹病毒）

ToRCH专指孕期的各种微生物感染。

检测的标本及方法

血液与血清：病原、DNA、抗原、抗体（特异性抗体的检测：血清学检测指标IgG、IgM属于间接指标，适合于筛查和免疫状态评估）；

尿液与尿沉渣、宫颈分泌物与宫颈拭子、尿道拭子、口腔标本：病原or DNA。

抗体定量分析是ToRCH筛查的进步

定量检测可以明确抗体随时间变化的趋势，确定感染状态，感染时间，区分原发和复发感染。

1）急性感染（原发、复发、再感染）：IgM抗体阳性；IgG抗体4倍增高；

2）既往感染：IgG水平不变，高亲和力IgG抗体；

3）原发感染：IgG阳转，低亲和力IgG抗体；

4）复发和再感染：高亲和力IgG抗体。

母体孕期感染对胎儿影响严重

1）母体感染与胎儿症状的出现一般间隔4-10周；

2）感染后导致红细胞寿命缩短，易引起胎儿贫血、流产、畸形和死胎；

3）孕中期胎儿红细胞密度增加3-4倍的话，感染后水肿的风险性最高。

总结

1）重视ToRCH的筛查，有利于减少出生缺陷；

2）血清学ToRCH检测中应重视以下问题。

（1）采用定量检测技术进行ToRCH血清学检测；

（2）采用双份血清进行定量检测，必要时采用IgG抗体亲和力检测。

08

专题发言：胎儿染色体嵌合体的诊断与遗传咨询

—— 王和 华西第二医院产前诊断中心

定义

在遗传学中，嵌合体（chimerism）是在胚胎发育早期阶段，多于一种受精卵的胚胎融合形成的两种以上基因型的个体（如IVF、双胎输血）。

注意：不是来自一个受精卵的胚胎突变或染色体缺失（重复）所形成的个体。

嵌合体发生机制（非整倍体）

1）任何影响有丝分裂染色体不分离的原因：年龄环境因素；

2）任何影响染色体畸变的原因：各种致畸因素各种致突变因素。

局限性胎盘嵌合

局限性胎盘嵌合发生率为1.5%，包括3种类型：

1）I型（50%），细胞滋养层； 

2）II型（30%）：绒毛间充质；

3）III型（20%），细胞滋养层和间充质细胞中的非整倍体。

仅为局限性胎盘嵌合一般对胎儿生长发育影响小。

染色体嵌合体的临床咨询处理

1）几乎每一个体都是“嵌合体”；

2）异常细胞比例越大，出现临床症状严重程度越大（检测到的异常细胞比例不一定代表真实情况，因为通常检测的样本来自于一种组织或局部）；

3）异常细胞分布的部位决定临床表现（某局部发育异常，要考虑嵌合）；

4）染色体平衡易位的嵌合常无异常临床表现（性腺除外）；

5）羊水细胞为嵌合体时，检测脐血不能证明胎儿临床表现的严重程度，但应注意5,12或20三体，或i（12p）的嵌合。

生殖腺嵌合

生殖腺存在遗传异常嵌合，本人不发病，但其后代发病，且无家族史。